Verbeterde DNA-tracering zet olijfolie-overspelers op de hoogte

Door Julie Butler
Olive Oil Times Bijdrager | Rapportage vanuit Barcelona

Dr. Juan de Dios Alche en Dr. Fendri Mahdi

Spaanse wetenschappers beweren dat ze dicht bij het aanbod zijn ​"vaderschapstests” voor olijfolie van de eerste persing, die een machtige bondgenoot tegen fraude zou zijn.

Hun vorderingen op het gebied van DNA-vingerafdrukken betekenen dat ze nu slechts relatief kleine monsters nodig hebben - meestal 100 - 200 ml - om te verifiëren of olijfolie van eerste persing echt van de variëteit en oorsprong is die wordt geclaimd.

En in tegenstelling tot chemische en sensorische tests - waarvan de resultaten hoogstens sterk kunnen aangeven dat de olie is versneden met een andere plantaardige olie - is het vinden van het DNA van bijvoorbeeld hazelnoot- of zonnebloemolie in olijfolie ondubbelzinnig bewijs van zijn aanwezigheid, zeggen ze.

Dr. Juan de Dios Alché, hoofdonderzoeker van het project van de Spaanse Nationale Onderzoeksraad (CSIC).Olive Oil Times er is nog veel werk aan de winkel, maar hij hoopt dat de test binnen zes maanden commercieel beschikbaar zal zijn.

"We hebben al aardig wat contacten gehad van mensen uit de voedingssector, ook in de Verenigde Staten, en denken dat er veel vraag naar is”, zegt hij.

Alché, van CSIC's afdeling Biochemie, Cel- en Moleculaire Biologie van Planten, onderdeel van deEstación Experimental del Zaidín instituut in Granada, legde ook uit dat het andere verificatietests substantieel zou aanvullen, maar niet vervangen.

Olive Oil Times: Wat zijn de voordelen van deze test?

Dr. Juan de Dios Alche: Olijfolie van eerste persing is relatief duur en mensen zijn bereid meer te betalen voor kwaliteiten die ze waarderen, zoals olie uit een bepaalde regio of variëteit, iets waar oneerlijke producenten misbruik van maken. Met deze test kunnen we dit verifiëren de authenticiteit van een olijfolie, die bevestigt of het echt van de oorsprong en variëteit of variëteiten is, vermeld op het etiket.

Vraag: Wat zijn de beperkingen?

A: Dit is geen test die de kwaliteit van een olijfolie bepaalt, maar vereist ook detectie van intact DNA, dat vaak moeilijk te vinden is in geraffineerde olie. is een van de redenen waarom het is ontworpen om te worden gebruikt voor olijfolie van eerste persing en moet worden gezien als een aanvulling op andere tests, niet als een vervanging.

Ook kunnen we in sommige gevallen monsters niet positief analyseren omdat ze zeer, zeer kleine hoeveelheden DNA bevatten of omdat het DNA is afgebroken.In dergelijke gevallen moeten we grotere monsters gebruiken, soms tot 1 liter Het gebruik van hoge temperaturen tijdens het malen is een manier waarop DNA wordt afgebroken.

Vraag: Hoe ben je ertoe gekomen om de test te ontwikkelen?

A: Als onderdeel van ons onderzoek naar pollen hebben we een grote database ontwikkeld met DNA-fragmenten van de bladeren van meer dan 90 verschillende olijfvariëteiten, voornamelijk uit Spanje, Portugal en Tunesië, maar ook met de meest gangbare rassen uit Italië, Griekenland, Frankrijk, Marokko en Libanon.

Een van de toepassingen is het certificeren van de olijvenvariëteit op basis van allergievaccins voor olijfpollen, maar we hebben geprobeerd en ontdekten dat we het ook konden gebruiken om olijfolie te identificeren, hoewel in Spanje de hele olijfvrucht, inclusief het zaad, wordt geplet om olie te maken en we weten niet precies waar het DNA dat we erin vinden vandaan komt.

V: Uw database is gebaseerd op DNA van olijfboombladeren, maar wetenschappers hebben gemeld dat het vinden van het DNA in bladeren van een olijfboom niet overeenkomt met dat van de olie van de boom.

A. We hebben ontdekt dat ze in verreweg de meeste gevallen samenvallen.

V. Hoe werkt de test?

A: Het is gebaseerd op het gebruik van microsatellieten (ook bekend als SSR's - Simple Sequence Repeats) als moleculaire merkers. We extraheren DNA en gebruiken wat staat bekend als polymerasekettingreactie (PCR) om deze SSR-sequenties te versterken. Vervolgens controleren we hun grootte door de maten te rangschikken en te vergelijken met wat er al in onze database staat.

Andere moleculaire markers lijken nu vingerafdrukken met een nog hogere resolutie te bieden dan SSR's, maar we gebruiken nog steeds microsatellieten omdat er al veel databases op gebaseerd zijn, zoals de onze, ze zijn gemakkelijk te interpreteren en te reproduceren, en ze hebben een hoog discriminerend vermogen.

Vraag: Duurt de test lang en is de voorbehandeling van het monster ingewikkeld?

A: Het duurt momenteel 7 – 10 dagen, inclusief analyse. We extraheren het DNA met behulp van een centrifuge, oplosmiddelen en commerciële kits die we op maat hebben gemaakt, en gebruiken gespecialiseerde laboratoriumapparatuur voor de test, met name een PCR-thermocycler en capillaire sequencer. ingewikkeld, relatief gezien.

Vraag: Welke vooruitgang heb je de afgelopen twee jaar gemaakt?

Naast het uitbreiden van de database, hebben we het proces van het extraheren van DNA uit oliemonsters geoptimaliseerd.We gebruiken verschillende methoden om het DNA te extraheren, waarvan sommige in de handel verkrijgbaar zijn, maar door ons aangepast. en we hebben ook het versterkingsproces geoptimaliseerd.

V. Zou deze test kostenefficiënt genoeg zijn om op grote schaal te worden gebruikt?

A. De prijs staat nog niet vast omdat we onze methode niet commercieel inzetten, maar we merken dat er vraag naar is vanuit de voedingssector en het is mogelijk dat over ongeveer zes maanden kunnen we het als service aanbieden en ja, het zou betaalbaar zijn.Een klein monster kan een grote partij olie verifiëren.

V: Waar ben je nu mee bezig?

De test duurt lang, dus we proberen dat te verminderen. We zijn ook van plan om een ​​breder scala aan olijfolie te testen.

Bovendien, hoewel we DNA van hazelnoot- en zonnebloemolie in olijfolie hebben kunnen detecteren, kunnen we tot nu toe alleen de aanwezigheid van externe oliën bevestigen, we kunnen het aandeel niet kwantificeren, dus daar zijn we ook mee bezig.

Verder lezen over moleculaire markers en authenticiteit van olijfolie verifiëren:

- Traceerbaarheid van olijfolie, olijfkiemplasma — De olijventeelt, tafelolijven en olijfolie-industrie in Italië, Dr. Innocenzo Muzzalupo (red.)

- Een overzicht van de authenticatie van olijfboom en olie

- Leven in de jaren 70 – Vervalsing door zaadoliën opsporen, Richard Gawel

Bronnen:

Techniek ontwikkeld om potentiële olijfoliefraude op te sporen. (Persbericht in het Spaans van het Zaidín Experimental Station van de Spaanse Nationale Onderzoeksraad.)
Voedselfraude bestrijden met wetenschap, Chemistry World
Olive-identificatie wordt snel en gemakkelijk, Olive Oil Times